第26回　シクロデキストリンを用いたプロポリス抽出液の粉末化と物性評価

プロポリスの問題点とシクロデキストリンに期待できるプロポリスの特性改善効果とは

• ピリ辛い味の改善
• 水への溶解性、或いは、分散性の改善
• においの改善
• 容器への付着防止作用
• 粉末化
• バイオアベイラビリティーの向上
• 吸湿性の改善
• 安定性の改善

用いたプロポリス抽出液

供給元：マヌカヘルスニュージーランド社

α、β、γ-CDを用いたプロポリス-CDの調製

γ-CD使用の場合のみ調製時に油が容器等に付着せず、粉末の色合いが薄かった。

プロポリス-CDの水分散性改善効果

プロポリス-γ-CD粉末が最も分散性に優れており、プロポリスとγ-CDの相性がよいように感じられた。

CDによる味覚改善効果

プロポリスの舌に対するピリピリ感に対してγ-CDが最も効果的に抑えることができた。

実機製造したプロポリス-γ-CDの味覚評価

プロポリス-γ-CDはプロポリスの特徴である舌に対するピリピリ感が少なかった。
一方、砂糖ではピリピリ感が強く残っていた。

プロポリス-γ-CD【実機製造品】の分析① -プロポリス含量（p-クマル酸相当量の比較）-

HPLC分析方法
カラム SunFire C18 5μm 4.6mm I.D. ×150mm （Waters Lot : 0130382611)

移動相：メタノール　70 / 水 30 / 酢酸 1 （isocratic)
流速：1.2mL/min
検出：330nm
測定原理：30分までのピーク面積の総量をp-クマル酸のピークとして算出。

日本健康・栄養食品協会
　プロポリス食品規格基準に準拠

プロポリス-γ-CDのプロポリス含有量は、処方値通りであり、加工工程で減少していないことが示された。

プロポリス-γ-CD【実機製造品】の分析② -総フラボノイド量の定量-

原理
ケルセチンの検量線を作成して、ケルセチン相当量として総フラボノイド量を算出。

方法

1. 以下の処方で試験液を調製した。
   
2. 撹拌
3. 室温静置、1時間
4. 420nmの吸光度を測定

S. Kumazawa et al. /
Food Chemistry 84 (2004) 329-339

プロポリス-γ-CDのフラボノイド量は、処方値通りであり、加工工程で減少していないことが示された。

プロポリス-γ-CD【実機製造品】の分析③ -総ポリフェノール量の定量-

原理
没食子酸の検量線を作成して、没食子酸相当量として総ポリフェノール量を算出。

方法

1. 以下の処方に従い、試験液を調製した。
   
2. 撹拌
3. 10％Na2CO3を添加 0.5mL
4. 撹拌
5. 室温静置、1時間
6. 遠心分離（3000rpm, 5min）
7. 上清を取り出し、760nmの吸光度を測定

S. Kumazawa et al. /
Food Chemistry 84 (2004) 329-339

プロポリス-γ-CDのポリフェノール量は、処方値通りであり、加工工程で減少していないことが示された。

プロポリス-γ-CD【実機製造品】の分析④ HPLCクロマトグラムとMSスペクトル

分析方法

カラム：CAPCELL PAK C18 ACR (SHISEIDO)　5μm(Median Particle Size)、2mm(Inner diameter)、250mm(Length)
移動相：phase A : 0.1% formic acid in water／phase B : 0.08% formic acid in acetonitrile
検出器：PDA and MS
インターフェイス：ESI　SIM : negative　m/z 283
カラム温度：40℃
流速：0.2 mL / min
プログラム：

CAPEの検出時間のMSスペクトル

HPLCクロマトグラム

プロポリス-γ-CDのHPLCクロマトグラムパターンは抽出液と同じであり、主要成分が加工工程で減少していないことが示された。

CAPEとピノバンクシン-3-アセテートが同じ検出時間であることが確認された。

CAPEのMSクロマトグラムと各成分の定量

プロポリス-γ-CDの成分値は処方値と酷似しており、重要な成分が加工工程で減少していないことが示された。

まとめ

• プロポリス粉末化に、より適したCDの検証
  →　α-CD、β-CDはプロポリス成分を高濃度で調製するとロスを生じた。
  →　水分散性評価及び味覚評価からγ-CDが優れていた。
• 実機製造したPE-γ-CDの味覚評価
  →　プロポリス独特のピリピリした刺激が抑えられていた。
• 実機製造したPE-γ-CDの成分分析
  →　プロポリス含有量及び主要な成分はほぼ処方通りの値が確認された。
• β-CDが食用として抱える問題点について
  アメリカ、ヨーロッパでは、世界食品添加物専門家会議（JECFA）においてβ-CDの一日許容摂取量（ADI）が制限されており（5mg/kg/day）、今回の配合比率で、日本健康・栄養食品協会が推奨するプロポリスの一日摂取目安量（500mg）を摂取した場合、β-CD量は1318mgにもなる（体重換算で263kg以上の人が許容）。
  （現在のところ、α-CD、β-CD、γ-CDいずれにおいても日本では摂取量の制限はない）

以上の点から、プロポリスの粉末化にはγ-CDが最も適しており、ハンドリングの向上や味覚改善が特性として判明した。
今後は安定性、吸収性、においの低減等の評価を行っていく。